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BioTNT cDNA第一链合成/RNA逆转录试剂盒
    产品中心    >>  试剂    >>  分子生物学试剂    >>  qPCR kits & 核酸抽提 关   闭
cDNA第一链合成/RNA逆转录试剂盒
分类:qPCR kits & 核酸抽提
品牌:BioTNT
货号:A2010A0604
原价:520
现价:¥399.00    节省:¥121
规格:20T
产地:BioTNT
产品参数

cDNA第一链合成RNA逆转录试剂盒说明书

货号:A2010A0604(10ul*40T)A2010A0601(10ul*100T), A2010A0603(10ul*400T)

试剂组成(请将试剂盒储存于-20度)

A2010A0604

 (10ul*40T)

5×Reaction BufferMg2+

120 μL/vial  1 Vial

M-MLV 酶(200 Units/μL

20 μL/vial  1 Vial

Recom. Rnasin40 Units/μL

10 μL/vial  1 Vial

通用引物oligodT)(100 μM

25 μL/vial  1 Vial

随机引物GPR-6100 μM

50 μL/vial  1 Vial

10mM dNTP mix

30 μL/vial  1 Vial

RNase-free ddH2O

1.5 mL/vial  1 Vial

说明书

1

 

A2010A0601

 (10ul*100T)

5×Reaction BufferMg2+

300 μL/vial  1 Vial

M-MLV 酶(200 Units/μL

50 μL/vial  1 Vial

Recom. Rnasin40 Units/μL

25 μL/vial  1 Vial

通用引物oligodT)(100 μM

60 μL/vial  1 Vial

随机引物GPR-6100 μM

120 μL/vial  1 Vial

10mM dNTP mix

70 μL/vial  1 Vial

RNase-free ddH2O

1.5 mL/vial  1 Vial

说明书

1

 

A2010A0603

10ul*400T

5×Reaction BufferMg2+

1.5 mL/vial  1 Vial

M-MLV 酶(200 Units/μL

200 μL/vial  1 Vial

Recom.  Rnasin40 Units/μL

100 μL/vial  1 Vial

通用引物oligodT)(100 μM

240 μL/vial  1 Vial

随机引物GPR-6100 μM

480 μL/vial  1 Vial

10mM dNTP mix

280 μL/vial  1 Vial

RNase-free ddH2O

1.5 mL/vial  4 Vial

说明书

1

 

产品介绍

cDNA 第一链合成试剂盒包括了一种全新高效逆转录酶、反应缓冲液及该实验中必需的反应组分。使用该试剂盒能够以总RNA mRNA 为模板高效逆转录成互补的cDNA 第一链,进而开展后继的相关实验。

试剂盒可逆转录0.110 μg 的总RNA20 μL逆转录体系,我们推荐1-2 μg的总RNA20 μL逆转录体系;

合成的cDNA模板用于定量PCRcDNA模板可在-20℃条件下保存一年。

 

产品使用限制

1.      本产品只用于分子生物学研究。其不应用于诊断、预防和治疗疾病。在使用本产品时应遵从相应的注意事项;

2.      本产品中部分试剂有腐蚀性或毒性,勿直接接触皮肤或吞咽;

3.      操作时请穿戴实验服和手套,如接触皮肤,应立即用大量清水冲洗;

4.      误食或其他危急情况,请及时到医院就治;

5.      部分试剂易燃,请注意消防安全。

 

客户自备设备和试剂

1.      已制备的总RNA样本;

2.      0.6mL1.5mL Eppendorf管(无菌、无酶、RNase-free;货号A2010B0X04);

3.      RNase-free Tips1000μL200μL的枪头;货号A2010B0X09);

4.      移液器(200μL1000μL);

5.      恒温水浴锅或金属浴,冰浴盒;

6.      12000g冷冻离心机;

 

操作说明

1.      提前将试剂盒中试剂及总RNA样本放置冰浴,温度平衡至冰点;

2.      震荡混匀所有试剂及总RNA样本并瞬时离心;

3.      在每个0.6 mL Rnase-free Eppendorf管中加入1-2 μg的总RNA样本;

4.      每管加入0.8 μl OligoDT以及1.6 μL随机引物GPR-6,补充适量的DEPC水至总体积达10 μL;(如所有样本RNA量相近,无需通过体积调整RNA量均一,这步也可计算配制总管预混后分装)

5.      震荡混匀后瞬时离心;

6.      恒温金属浴70℃温育5 mins,冰浴备用;

7.      按下表配置RT反应液,震荡混匀;

下表为1份样本的量,如需要逆转录n份的RNA,请配置n+1份进行分装:

反应液组分

20-μL体系

终浓度

5×Reaction Buffer

4.0 μL

1×

10mM dNTPmix

1.0 μL

0.5 mM

Recombinant Rnasin40 Units/μL

0.3 μL

0.6 Units/μL

M-MLV200 Units/μL

0.8 μL

8 Units/μL

RNase-free ddH2O

3.9 μL

——

共计

10 μL

 

8.      在冰浴后的每个离心管中加入RT反应液10 μL,此时离心管内总体积为20 μL

9.      震荡混匀后瞬时离心;

10.   恒温金属浴中42℃反应60 mins

11.   cDNA产物应置于-20℃保存。

 

注意事项

1.      本试剂盒可逆转录合成体系为20 μLcDNA样本,如需要加大体系,可等比增加加入试剂量;(例:合成100 μLcDNA,所有试剂加入量乘以5倍)

2.      本试剂盒试剂额外损耗相对较大,建议客户根据自身样本数量订购相应规格的试剂盒,以免出现试剂浪费或不足现象;

3.      RNA量建议大于100 ng,以保证cDNA得率;

4.      样本中建议避免有机物或酚污染,以保证逆转录效率;

5.      M-MLVRecombinant Rnasin含有甘油,在-20℃条件下是液体,保存时间为1年,避免保存在-80℃导致反复冻融,避免在常温下保存的时间过久影响效价;

6.      得到的cDNA产物建议直接用PCR 或者Real Time PCR进行内参验证。

 

技术支持

BioTNT为其所提供的技术支持质量和效率而自豪。我们的技术支持部门在样品及检测领域及对BioTNT产品具有丰富的实践经验和充足的理论知识。如果您PCR或其它产品有问题或遇到困难,请联系我们,无需迟疑。

BioTNT客户是我们产品改进和特殊应用信息的主要来源。您所提供的信息对于BioTNT的研究人员很有帮助。当您对产品性能或新的应用及新的技术有任何建议时,我们希望您能及时联系我们。

 

有关技术支持和更多信息,请浏览www.biotnt.com的网页或致电BioTNT的技术支持部门。

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