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ELISA Reasgents

BioTNT 推出ELISA包被经济套装CPICPV,方便客户进行ELISA 的包被实验。

 

     可用于进口未包被ELISA 抗体对进行包被实验的配套使用, 品质优良, 完全可以替代原装进口产品。也可用于实验室自己进行ELISA的构建研究。

 您购买的原装ELISA原料如何才能得到稳定的实验结果和更高的灵敏度?


Biotnt CPICPV套餐来帮您:

    ELISA 包被经济套装CP1为基础套餐,包含必要的包被和ELISA配套实验试剂;套餐CPV 为补充套餐,包含的试剂成分是为了更好的保证包被和实验质量;

如果客户购买RND systems的duoset 未包被ELISA kit,试剂盒提供:CaptureAntibody (1 vial) ,Detection Antibody (1 vial) ,Standard,Streptavidin-HRP (1 vial);           Biotnt 的套餐CP1 CPV   提供了适用于RND duoset 包被除了洗液外的所有试剂;


其中:CPI 套装包含基础包被和ELISA配套试剂: 

产品编号

产品名称

EL-CPI-5

EL-CPI-20

EL-CPI-50

EL-CP101

coating buffer 包被缓冲液

15ml(10X)

60ml (10X)

150ml(10X)

EL-CP102

酶标板稳定剂

100ml(即用型)

400ml(即用型)

1000ml(即用型)

EL-CP103

显色液A,B(Substrate A,B)

30ml(各1瓶,共两瓶)

120(各1瓶)

300ml(各1瓶)

EL-CP104

终止液(Stop Solution)

50ml(即用型)

200ml(即用型)

500ml/(即用型)

EL-CP105

酶标板自封铝箔袋

5个

20个

50个

EL-CP106

干燥剂

5袋

20袋

50袋

 

其中:EL-CP103,显色液A,B, 采用TMB系统,TMB在辣根过氧化物酶(HRP)的显色反应系统中, 比其他色原具有更高的灵敏度,且没有致癌性而被广泛应用。

Biotnt 提供的TMB主要优点:

1.稳定性好:室温储存12个月;2-8度至少24个月;

2.安全性好:不含有害溶剂,如DMF或者DMSO

3.双组分, 灵敏度极高;

4.批间差小,背景低,效率高;

 

EL-CP102酶标板稳定剂:可与国外原装酶标板稳定剂相媲美,上百次实验验证;可以集blocking和酶标板稳定于一步。

Biotnt 提供的酶标板稳定剂可以给您两方面的帮助:

1. 封闭非特异性和未结合的位点,减少实验背景;

2.稳定被固定的生物分子,改善测试试剂盒的货架寿命;

 

 

套餐2   CPV 为补充套餐,包含的试剂成分是为了更好的保证包被和实验质量,包含六个组分:

产品编号

产品名称

EL-CPV-5

EL-CPV-20

EL-CPV-50

EL-CPV01

Nunc 单条可拆酶标板 maxisorp

5个/包

20个/包

50个/包

EL-CPV02

样品稀释液:直接用来稀释血清样品

50ml

50ml

50ml

EL-CPV03

样品稀释液:用来稀释细胞上清样品或其他非血清样品

50ml

50ml

50ml

EL-CPV04

生物素(Biotin)稀释液

25ml

100ml

250ml

EL-CPV05

HRP耦联物保护剂/稳定稀释液

50ml

200ml

500ml

封板膜

1大张

4大张

10大张

  1. 酶标板:提供高灵敏nunc 单孔可拆酶标板(maxisorp)(EL-CPV01)                                              

  2. 样品稀释液:biotnt提供的样品稀释液同时可用于标准品的稀释,可以降低零孔的本底; EL-CPV02)(EL-CPV03);用PBS 来代替时,本底会升高;

  3. biotin 稀释液:可稳定保存biotin 抗体,(EL-CPV04);用PBS 来代替时,biotin 溶液不够稳定;

  4. HRP耦联物保护剂/稳定稀释液:Biotnt 提供,(EL-CPV05); PBS 来代替时,稳定性不好,本底升高,实验的灵敏度降低;

                                           
                                       

    酶的稳定性是相对的,辣根过氧化物酶具有蛋白质的本质属性,例如变性,自我凝集,降解等等,所有这些都可以使蛋白质生物活性降低甚至丧失其功能,特别是在蛋白的浓度比较低的情况下。

    通常,蛋白质分子在低温和高浓度时最稳定。所以,国外提供的HRP通常是几万倍的浓度,在使用时要稀释很多倍,影响了实验的方便程度。

    Biotnt提供的HRP耦联物保护剂/稳定稀释液,可以方便您的实验工作。可以把几万倍的HRP浓缩液用HRP耦联物保护剂/稳定稀释液稀释至100×或者20×,可以在4度稳定保存半年。

    也可以用HRP耦联物保护剂/稳定稀释液稀释为即用型,方便您日常实验的使用。

                                           
                                       

产品特点:

  提高信燥比:可以提高免疫实验的敏感度,降低背景;

  提高了实验的可重复性;

  洗液:包被过程和实验过程中用于洗板;如果对实验要求不高,可以用PBS 代替;(EL-00402,用于5块板);


套餐三:


产品编号

产品名称

EL-CPX-5

EL-CPX-15

EL-CPX01

coating buffer 包被缓冲液

15ml(10X)

50 ml (10X

EL-CPX02

Nunc 单条可拆酶标板 maxisorp

5个/包

15个/包

EL-CPX03

酶标板稳定剂

100ml(即用型)

300ml(即用型)

EL-CPX08

标准品稀释液和血清样品稀释液

50ml

50ml

EL-CPX04

生物素(Biotin)稀释液

25ml

75ml

EL-CPX05

HRP耦联物保护剂/稳定稀释液

50ml

150ml

EL-CPX06

显色液A,B(Substrate A,B)

30ml(各1瓶,共两瓶)

100(各1瓶,共两瓶))

EL-CPX07

终止液(Stop Solution)

50ml(即用型)

150ml(即用型)


其他需要的试剂,可在产品目录中查询:

品名 货号 特性 品牌 规格 价格
包被经济套装I EL- CPI-20 BioTNT 20块板 ¥2070
¥1590
包被经济套装I EL- CPI-50 BioTNT 50块板 ¥4820
¥3710
ELISA 洗涤液 EL-00402 BioTNT 250ml ¥80
¥64
HRP辣根过氧化物酶标记Streptavidin EL-00702 BioTNT 0.1ml ¥210
¥159
蛋白质稳定剂1 EL-00801 BioTNT 20ml ¥140
¥106
BSA EL-01202 BioTNT 5g/瓶 ¥50
¥42
0.01M PBS (干粉) PH7.2-7.4 EL-01203 BioTNT 2L ¥20
¥16
显色液A,B(Substrate A,B) EL-CPI03 BioTNT 50*2(各1瓶) ¥260
¥201
终止液(Stop Solution) EL-CPI04 BioTNT 50ml(即用型) ¥70
¥53
酶标板自封铝箔袋 EL-CPI05 BioTNT 100个 ¥140
¥106
干燥剂 EL-CPI06 BioTNT 100袋 ¥40
¥32
包被经济套装I EL-CPI-5 BioTNT 5块板 ¥690
¥530
Nunc 单条可拆酶标板 maxisorp EL-CPV01 BioTNT 5个/包 ¥210
¥159
样品稀释液:直接用来稀释血清样品 EL-CPV02 BioTNT 100ml ¥70
¥53
样品稀释液:用来稀释细胞上清样品或其他非血清样品 EL-CPV03 BioTNT 100ml ¥70
¥53
生物素(Biotin)稀释液 EL-CPV04 BioTNT 25ml ¥280
¥212
HRP耦联物保护剂/稳定稀释液 EL-CPV05 BioTNT 50ml ¥280
¥212
包被经济套装2 EL-CPV-20 BioTNT 20块板 ¥1650
¥1272
包被经济套装2 EL-CPV-5 BioTNT 5块板 ¥550
¥424
包被经济套装2 EL-CPV-50 BioTNT 50块板 ¥3310
¥2544
ELISA包被经济套餐3 EL-CPX-15 BioTNT 15块板 ¥2070
¥1590
ELISA包被经济套餐3 EL-CPX-5 BioTNT 5块板 ¥1100
¥848
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Biotnt 提供以下标本代测服务和ELISA包被服务:


1、 预包被试剂盒的查找和代测服务:Biotnt 提供以下品牌如美国AntigenixADIBiolegend,Crystalebioscience monobindpheonixpeptideRaybiotechRndsystemsZeus scentific, 德国LDN, DRG, domesticIBL, 日本shibayaji,瑞典Mercordia, 加拿大Anogen,等国际著名ELISA品牌的试剂盒代购和实验代测服务;更多可靠品牌可以查询,并咨询相应地区销售负责人;

 

2 BioTNT 推出RND duoset试剂盒的包被和检测服务:

您在RND Systems 官网查询到的duoset 试剂盒,由biotnt 代购 或者由客户自己提供,biotnt 进行包被和代测服务,仅收取1000元/板的技术服务费,每板可以进行80个样品的单孔检测;

举例:

购买:

Human Angiopoietin-2 DuoSet, 15 Plate 货号:DY623

可进行15块板的包被和检测; 费用仅需:8440+15000=23440;

合计:每块板的费用为:1563元;

优点:可以用RND 品牌发表文章,发表文章时materials:Human Angiopoietin-2 DuoSet, Biotnt construct pack I and Biotnt construct pack II;

BioTNT 技术中心多年ELISA 实验经验,保证您获得可靠的实验数据;

 

3BioTNT 推出ebioscience ELISA Ready-SET-Go!®的包被和检测服务;

您在ebioscience官网查询到的ELISA Ready-SET-Go!®试剂盒,由biotnt 代购 或者由客户自己提供,biotnt 进行包被和代测服务,单块板收取1500/板的技术服务费,包括试剂盒的购买费用;每板可以进行80个样品的单孔检测;

举例:

购买:

Human IL-10 ELISA Ready-SET-Go!® 货号:88-7106

每块板的费用仅需要1500元;

优点:可以用ebiosceince 品牌发表文章,发表文章时materials:Human IL-10 ELISA Ready-SET-Go!®; 货号:88-7106 ;Biotnt construct pack I and Biotnt construct pack II;

BioTNT 技术中心多年ELISA 实验经验,保证您获得可靠的实验数据;

 

4、BioTNT 推出antigenix ELISA construction kit的包被和检测服务;

您在antigenix官网查询到的ELISA construction kit 试剂盒,由biotnt 代购 或者由客户自己提供,biotnt 进行包被和代测服务,仅收取1000元/板的技术服务费,每板可以进行80个样品的单孔检测;

举例:

购买:

Mouse IL 1 Beta Construction Kit; 货号:RMF120CK

可进行10块板的包被和检测; 费用仅需:6500+10000=16500;

合计:每块板的费用为:1650元;

优点:可以用antigenix 品牌发表文章,发表文章时materials:Mouse IL 1 Beta Construction Kit; 货号:RMF120CK ;Biotnt construct pack I and Biotnt construct pack II;

BioTNT 技术中心多年ELISA 实验经验,保证您获得可靠的实验数据;

 

5、BioTNT 推出Biolegend ELISA 未包被板的包被和检测服务;

您在biolegend 官网查询到的ELISA construction kit 试剂盒,由biotnt 代购 或者由客户自己提供,biotnt 进行包被和代测服务,仅收取1000元/板的技术服务费,每板可以进行80个样品的单孔检测;

举例:

购买:human IFN gamma ELISA 5块板,未包被包装;

可进行5 块板的包被和检测; 费用仅需:4000+5000=9000;

合计:每块板的费用为:1800元;

优点:可以用Biolegend 品牌发表文章,发表文章时materials:human IFN gamma ELISA ;Biotnt construct pack I and Biotnt construct pack II;

BioTNT 技术中心多年ELISA 实验经验,保证您获得可靠的实验数据;

 

以上所有检测服务,如果不需要,仅需要提供包被服务,价格相同;包被板可以稳定6个月(包被质量依赖于capture 抗体的质量)

 

6、 Biotnt 同时提供可与原装进口媲美的ELISA Construction Pack, 方便客户进行ELISA 实验;

7、Biotnt 提供更多的ELISA developing 试剂,方便您进行ELISA的科研和生产;

8、Biotnt 提供抗体选择咨询:依据多年的ELISA实验经验和严禁的实验态度,Biotnt 愿与您探讨ELISA抗体的选择和购买;

9、 对于客户提供的一抗和二抗,标准品进行试剂盒研发,收取3000元/每个项目的研发费用;

10、 ELISA 辅助服务:如果客户提供的是固体样本,如组织或细胞,需要Biotnt 进行组织匀浆或细胞裂解,提蛋白,以及蛋白定量;这一步需要收取费用;


ELISA 样本:

    建议客户提供液体标本进行ELISA检测,如血清,抗凝血浆,细胞上清,其他生物学体液;如客户的样本为组织或者细胞等非液体样本,需要进行样本的预处理;客户可以自己对样本进行预处理,如组织的匀浆,然后测定蛋白含量;细胞样本进行细胞裂解液制备后,也需要进行蛋白定量;蛋白定量请采用Bradford 法或者BCA法进行。

 

 


注意事项及说明:

Ø  上述试剂均可2-8℃保存,保质期为一年;其中终止液可以室温或低温保存;

Ø  试剂如储存时间较久,请在正式实验前进行预实验验证试剂质量;

Ø  显色液B液需避光保存;

Ø  酶标板稳定剂经0.2um过虑,含非汞防腐剂以抑制保存过程中微生物繁殖;

Ø  为了您的安全和健康,请穿实验服并戴防护手套操作。


试剂使用说明和包被实验示例:

一、包被液的配制:

coating buffer 包被缓冲液(EL-CPI01):该试剂为10X 浓缩液,使用前请根据实验用量,用蒸馏水稀释至1X,即配即用,例:10ml coating buffer + 90ml蒸馏水;

 Coating buffer 用于抗体的包被;可替代以PBS为主的包被液体;请用1* coating  buffer和适量抗体配成包被液,抗体浓度请参考抗体的说明。


二、包被实验示例:

ELISA酶标板(EL-CPI02中每孔加入100ul包被液(包被液若有剩余可多包被一点,以条为单位),在板上贴膜,室温(控制室温在25,板放置处旁放置温度计控温)温育过夜(下午4点到第二天早上9点,不宜缩短时间,会降低包板效率);结束温育(也请参考抗体说明书的包被条件进行相应调整)。多余的配好的包被液不能保存。


三、洗板封闭:

1)        洗液20×Wash BufferEL-00402(可以用PBS +Tween 20代替)配制成1×Wash Buffer(实验前请合理计算用量,配制成足够的量待用),用1×Wash Buffer洗板4次(注:包被组分在加稳定剂前不能剧烈震荡或完全干燥,所以洗板过程需快速、温和,不要拼命拍板);

2)        洗板后立即加入200ul每孔的酶标板稳定剂(EL-CPI02),37温育1小时;

3)        弃掉或吸取酶标板稳定剂(注:拍干,千万不要洗板)。


封闭好的酶标板可以有以下几种处理方式。

方式一:直接进行检测。


方式二:

1)   冻干成品:把酶标板放入冰箱,-20℃冰箱冷冻过夜。

2)   调试真空冻干机,立即将冷冻过夜的酶标板放入真空冻干机冻干24小时;

3)   取出冻干的酶标板,立即将酶标板放入一个装有干燥剂(EL-CPI06)的铝箔袋内(EL-CPI05),贴上标签,放4℃冰箱长期保存。(冻干同时可进行标准品冻干)。


方式三:室温晾干

按照以下方法晾干长期保存:

1)   室温或者 37°C ;

2)   湿度: 最好在一个湿盒中(小于 15% 湿度);

3)    时间: 2-24 小时,晾干;确认干燥

4)   立即将将经过稳定剂处理的产品封装在一个含有干燥剂(EL-CPI06)的密闭防潮容器中,正确使用干燥剂包装是长期保存的关键。

注意:如果酶标板不直接进行检测,必须采用方式二或者方式三,进行干燥。干燥后的酶标板才可以稳定保存。


四、检测方法示例

(请参考抗体说明,安排相应的检测方法,根据您的实验路线,如果是双抗夹心法,可以选择酶标二抗,也可以选择生物素二抗,采用生物素-亲和素的放大系统):

实验示例:下面是双抗夹心法的实验示例: 

1)        以上的酶标板已经预包被了抗体,选取相应的板条;

2)        标准品请用相应的稀释液稀释;如检测的是血清,标准品用EL-CPV02稀释;如果检测的是细胞上清样品或其他非血清样品,请用EL-CPV03稀释;

3)        酶标板中加入适量稀释好的标准品和样品,各100ul

4)        37度温育12小时;

5)        洗板四次(洗液同上);

6)        生物素二抗请根据说明书,用生物素(Biotin)稀释液(EL-CPV04)进行稀释;

7)        37度温育30分钟;

8)        洗板四次;

9)        酶标二抗,请用(EL-CPV05)稀释;

10)     每孔加入100ul 稀释好的酶标二抗,37度温育1小时或其他时间;

11)     洗板四次;

12)     加入显色液:显色液ABSubstrate AB)(EL-CPI03);使用前请按按照A液和B11比例充分混匀,方可使用,使用前15分钟配置;每孔加入50ul-100ul混合后的显色液;室温温育10-30分钟:显色时间根据目测最高浓度标准品的颜色,应为深蓝色,630读数,OD 值应在0.7以上;

13)     加入终止液(Stop Solution)(EL-CPI04100ul 每孔。

加入终止液50ul-100ul,显色从蓝色转为黄色。建议采用450-630的双波读数。

 

注:根据实验设计不同的包被浓度,酶标二抗浓度,HRP浓度,反应时间等变量,找到最优化的实验条件。确定试剂盒定量范围、灵敏度等试剂盒特性。

双抗夹心法可以回归为线性、二次曲线,或者四参数曲线;

竞争法可以回归为log-logit,或者四参数曲线;


ELISACAL
技术支持:support@biotnt.com    产品咨询:sales@biotnt.com    售后服务群:47468567
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