产品参数
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PAXgene Blood RNA Tubes适用于采集全血并稳定细胞内RNA,在18–25°C条件下可稳定长达3天(参见"RNA stability at 18–25°C: FOS"和"RNA stability at 18–25°C: IL1B"),或在2–8°C条件下稳定长达5天(参见"RNA stability at 2–8°C: FOS"和"RNA stability at 2–8°C: IL1B")。当前的数据显示,细胞内RNA在–20°C或–70°C条件下可保存至少60个月。
Procedure
PAXgene Blood RNA纯化操作流程简单,可手动或自动进行(参见"Manual PAXgene Blood RNA procedure"和"Automated PAXgene Blood RNA procedure")。
PAXgene Blood RNA纯化手动流程
将重悬的沉淀和蛋白酶K一起溶解在经优化的缓冲液中孵育,进行蛋白质酵解。然后应用PAXgene Shredder离心柱再次离心,匀浆细胞裂解液,并去除剩余的细胞残骸。将流过部分的上清液转移到干净的微型离心管中,加入乙醇调节结合条件,将裂解液装入一个PAXgene RNA离心柱中。快速离心后,RNA会选择性地结合到PAXgene硅胶膜上,杂质则流过。剩余的杂质通过几次高效洗涤去除。在第一次和第二次洗涤步骤之间,使用DNA酶处理膜,以去除微量残余的DNA。洗涤之后,使用洗脱缓冲液洗脱RNA并进行热变性。
PAXgene Blood RNA纯化自动流程
使用QIAcube全自动核酸纯化仪制备样品的流程与手动法相同,您可继续使用PAXgene Blood RNA Kit纯化高品质RNA。
自动化的RNA纯化流程由两个部分组成,"PAXgene Blood RNA Part A"和"PAXgene Blood RNA Part B",在两个部分之间需要短暂的手工操作。
将经离心、洗涤、重悬的核酸沉淀从PAXgene Blood RNA Tube转移到离心管中,将离心放到QIAcube全自动核酸纯化仪工作台的恒温震荡器中。实验员选择并启动菜单中的"PAXgene Blood RNA Part A"。QIAcube全自动核酸纯化仪会自动运行,直到将RNA洗脱至洗脱缓冲液中。实验员将含有已纯化RNA的离心管转移到QIAcube全自动核酸纯化仪的恒温震荡器中,选择并启动菜单中的"PAXgene Blood RNA Part B",QIAcube全自动核酸纯化仪会执行热变性。
样本平均制备时间是125分钟(基于制备12个样本的时间),手工操作时间只需约20分钟。
Applications
该试剂盒与PAXgene Blood RNA Tubes共同使用,可从全血中分离纯化细胞内RNA进行RT?PCR。
Features
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Specifications
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Additive/concentration |
Additive 6.9 ml |
Closure type/color |
BD Hemogard/Red |
Draw volume |
2.5 ml |
Label type |
Paper |
Quantity |
8.5 ml |
Tube size |
16 x 100 mm |