Nano-二抗，新一代二抗
-------结合了直接和间接免疫荧光的优势
了解直接与间接免疫荧光方法之间的差异，体会Nano-二抗的优势：
免疫荧光 (IF) 或细胞成像技术使用抗体将荧光染料（也称为荧光素或荧光物）标记到特异性目标抗原上，所用荧光染料有诸如异硫氰酸荧光素 (FITC) 等。而通过化学方法偶联荧光素的抗体被广泛使用于IF实验中。
荧光素的使用使得用户通过荧光显微镜（例如表面荧光显微镜和共聚焦显微镜）观察样品中的靶标分布情况。根据荧光素与一抗还是二抗偶联，我们将 IF 方法分为两类：
· 直接 IF-使用单个抗体，该抗体直接指向目的靶标，一抗与荧光素直接偶联。
· ?间接 IF-使用两个抗体，一抗未偶联，荧光素偶联的二抗指向一抗，并用于检测。
下图描述了直接和间接方法，其中Nano 二抗作为纳米的Alexa Fluor® 偶联二抗，有效规避了直接抗体和间接抗体的缺点，优势最大；如下表所示，三种方法优缺点如下：
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直接
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间接多克隆荧光二抗
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间接Nano-二抗
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时间
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短：直接 IF 的实验方案通常较短，它只需要一个标记步骤。
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长：使用偶联二抗检测一抗会增加额外的操作步骤。
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短：Nano 二抗可以使用一步染色，实验方案时间同直接法
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成本
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贵：偶联一抗通常比未偶联一抗更贵。
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便宜：与一抗相比，二抗相对更便宜。使用相同的偶联二抗检测不同的一抗能进一步节约成本。
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便宜：价格比购买直标抗体便宜
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复杂度
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简单：直接方法的实验方案步骤较少，更简单。
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复杂：间接方法中必须选择适当的二抗，增加了复杂度。这种情况在需要使用多个二抗的多色实验中尤为突出，每个二抗需要靶向不同的物种并偶联至不同染料。
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简单：实验方案步骤较少，同直接法。同样需要选择适当的二抗，这点同间接法。
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灵活性
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差：市场上可获得的偶联一抗限制了灵活性。
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好：不同偶联二抗的可用性大大增加了灵活性。
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好：提高了一抗使用的灵活性，同间接多克隆荧光二抗的优点。
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灵敏度
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差：直接方法中获得的信号与间接方法相比可能较弱，因为直接方法中没有使用二抗进行信号放大。
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高：多个二抗结合一抗可使信号放大。
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高：信号强，一个一抗可以结合4个Nano-二抗，一个二抗结合了两个荧光素，信号放大8倍。
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物种交叉反应性
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低：直接方法中，物种交叉反应被降至最低，因为荧光素已经与一抗偶联。
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有：二抗可能与不是靶标的生物体发生交叉反应。使用预吸附二抗能防止交叉反应。
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低：物种交叉反应经测试，很低。
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背景
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低：使用偶联一抗可减少非特异性结合。
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高：间接方法中，含有内源性免疫球蛋白的样品可能显示高背景。
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低：背景低，非特异性结合少
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重复性
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优：重复性优
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差：重复性差，多克隆抗体结构导致复合物荧光
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极优：重组生产的抗体，无批间差；染色结果可重复；
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直接和间接方法不仅仅限于免疫荧光。它们也与其它依赖于荧光素偶联抗体的技术相关，例如流式细胞术、ELISA 和免疫组化。
Nano 二抗货号 品名
srbAF488-1 alpaca anti-rabbit IgG, recombinant VHH, Alexa Fluor® 488 （绿色）
srbAF568-1 alpaca anti-rabbit IgG, recombinant VHH, Alexa Fluor® 568 （橙红）
srbAF647-1 alpaca anti-rabbit IgG, recombinant VHH, Alexa Fluor® 647 （远红）
规格：10ul，100ul