A：是的。采用最常用的试剂如多聚甲醛、戊二醛、甲醇来固定，然后染色， Booster染色表现都很好(Kaplan & Ewers, 2015; Ries et al., 2012).
A：是的，如果GFP / RFP标签位于细胞表面上，可以适用于活细胞成像。作为一种15kda蛋白，Booster不穿透未渗透的细胞膜。因此，如果你的GFP是细胞内的，你必须固定和渗透细胞。或者，可以将增强蛋白微注射或电穿孔到细胞中用于活细胞成像，但是这些方法很少使用。
细胞外GFP / RFP-tag标签的活细胞增强染色方案是什么？
将细胞与Booster 按照1∶25，在+ 4℃的生长培养基中孵育15分钟，洗涤并成像。该方案将仅突出显示融合蛋白的质膜池。
Nano-Boosters能穿透活细胞的细胞膜吗？
不。Nano-Booster的尺寸为15kda，并且它们不穿透未渗透的细胞膜。通过不同的蛋白质转导方法和试剂，可以在活细胞中引入少量的Nano-Boosters，但最有效的方法是微注射。
Q：我能同时用GFP和RFP-Booster共同染色吗？
A：在是的，你可以把Booster组合起来。例如，如果您通常使用1 : 200稀释的Boosters，则为了共同染色，您应同时添加1ul gba488以及1ul rba594至200 uL的封闭溶液。
Q：哪些Booster复合物推荐用于超分辨率显微镜？
A：Nano-Boosters复合物非常适合于超分辨率显微镜。由于它们的尺寸小( 2 - 3 nm )，它们使连接误差最小化并提供比常规抗体更精确和更致密的染色。Booster复合物的选择取决于您的显微镜设置和激光。我们建议:
STED: ATTO647N, Abberior STAR 635P
STORM: ATTO488/594/647N, 或者custom conjugation to Alexa647
SIM: ATTO488/594
是的。您可以标记我们未结合的GFP结合蛋白( 15kda；货号: gt - 250 )，并按照染料制造商的说明选用NHS染料。或者，您可以利用我们的服务为Booster定制标记荧光。请发邮件到info@chromotek.com 进行询问。
我能做双色超分辨显微镜结合GFP -和RFP -Booster吗？
是的, Bleck 等人,在PNAS 2014 http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/ 25099357 中； Platonova 等人, ACS Chem Biol 2015 http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/25806422；
使用Nano-Booster，描述了双色风暴；
Q：Boosters是否适合在酵母中使用，用于免疫荧光实验？
A：是的，用Boosters对酵母进行免疫染色比用常规抗体更简单，因为它们的小尺寸Nano-Boosters可以穿透酵母细胞壁。在t Kaplan & Ewers, Nat Protoc. 2015:www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/26068895中详细介绍了一种优化的Nano-Boosters (GFP nanobody)染色酵母的方案
Q：GFP-Booster 可识别的GFP变异体有哪一些？
A：GFP-Booster 可识别:
• eCFP, CFP, mCerulean
• eGFP, wtGFP, GFP S65T, AcGFP, TagGFP, tagGFP2, sfGFP, pHluorin
• eYFP, YFP, Venus, Citrine
RFP-Booster 可识别的RFP变异体有哪一些？
RFP-Booster 可识别 mRFP, mCherry, mRFPruby, tdTomato, mPlum