IF=10.7|BioTNT助力生物医疗研究：新苞拉坦与曲美替尼协同诱导胰腺癌细胞凋亡及Gasdermin E依赖性细胞焦亡

2025年7月，上海中医药大学药学院、上海交通大学医学院附属瑞金医院胰腺疾病中心普外科、上海交通大学医学院胰腺疾病研究所、上海中医药大学附属曙光医院在国际期刊《MedComm》上发表的，题为“Neobractatin and Trametinib Synergistically Induce Apoptosis and Gasdermin E-Dependent Pyroptosis in Pancreatic Cancer Cells”的论文。谭佳琪，鲍子毅，秦凯，朱柳菁，郑昌武等为第一作者，金佳斌，张莉，徐洪熙为通讯作者。

BioTNT相关：

1.microRNA定制服务

细胞转染

GSDME与caspase-3的小干扰RNA（siRNA）购自GenePharma（中国上海），miRNA抑制剂购自冠泰生物（BioTNT,中国上海）。将细胞接种于六孔板中，按照制造商说明书[44]，使用Lipofectamine 2000转染试剂（美国Invitrogen公司）进行siRNA或miRNA抑制剂转染。

2. miRNA RT-PCR检测试剂盒

实时定量PCR（RT-PCR）
胰腺导管腺癌（PDAC）细胞分别经新苞拉坦（1 µM）、曲美替尼（5 µM）或联合处理12小时后，采用TRIzol试剂（日本Takara公司）提取细胞及PDAC患者组织总RNA，并使用逆转录酶（Takara）合成cDNA。随后按照说明书操作，采用miRNA RT-PCR检测试剂盒（BioTNT,上海）检测miRNA表达水平。定量分析方法参照先前文献[44]，所用引物序列详见附表S3。

摘要
丝裂原活化蛋白激酶激酶（MEK）突变在胰腺导管腺癌（PDAC）中普遍存在，但多数MEK抑制剂会意外激活蛋白激酶B（AKT）。本研究提出一种新型PDAC治疗策略——将MEK抑制剂曲美替尼与藤黄属植物提取物新苞拉坦（NBT）联用。结果表明，该联合方案通过诱导Gasdermin E（GSDME）介导的细胞焦亡与凋亡显著抑制肿瘤生长。GSDME在PDAC组织中过表达且与组织分化程度相关，提示焦亡在PDAC中的重要作用。RNA测序显示磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/AKT）通路是联合治疗的主要靶点。机制研究表明，该组合能同步降低总AKT及磷酸化AKT水平，从而抑制AKT/IκB激酶（IKK）和AKT/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路，并通过破坏mTOR复合体2（mTORC2）阻止曲美替尼诱导的AKT激活。microRNA测序分析发现联合治疗通过上调miR-149-5p降低AKT表达。进一步研究证实该组合可增加细胞内活性氧（ROS）水平，而ROS清除剂N-乙酰半胱氨酸（NAC）能逆转其对细胞生长和AKT的抑制作用。体内实验显示，该方案通过诱导焦亡和凋亡显著抑制肿瘤生长，效果优于吉西他滨。本研究揭示了NBT与曲美替尼通过ROS/AKT/GSDME轴协同诱导焦亡与凋亡的作用机制，为PDAC治疗提供了新理论依据。