IF 6.1| BioTNT助力生物医学研究：S100A9 作为糖尿病足溃疡的治疗靶点具有广阔的前景
2025年4月，海军军医大学长征医院在期刊《Chinese Medical Journal》上发表的，题为“S100A9 as a promising therapeutic target for diabetic foot ulcers”的论文。Renhui Wan,Shuo Fang同位第一作者，Tuo Li, Yongquan Shi为通讯作者。
背景：糖尿病足是一种发病率、复发率、死亡率和致残率均较高的复杂病症。目前针对糖尿病足溃疡的治疗方法往往效果不足。糖尿病足与神经和血管损伤密切相关，还可能因高血糖引发继发感染。然而，糖尿病足的精确病理机制尚不明确，目前的治疗方法（如清创术）通常效果有限。近年来，基因测序技术的进步使得全基因组分析得以广泛应用，有助于识别关键基因和潜在治疗靶点。基因表达综合数据库（GEO）存储了大量基因表达数据，通过对这些数据的整合和分析，可以为糖尿病足的病理机制和潜在药物靶点提供新的见解。
研究信息：S100 钙结合蛋白 A9（S100A9）是一种由 114 个氨基酸组成的蛋白质，常与 S100A8 形成异二聚体和四聚体。它作为调节亚基，防止 S100A8 的降解。S100A9 与炎症反应密切相关，在促炎和抗炎过程中发挥双重作用。此外，S100A9 还被证明可刺激多种肿瘤细胞的增殖和迁移，并在银屑病患者中高表达。本研究旨在识别目标基因，验证这些基因的表达，并探索这些目标基因在糖尿病足溃疡愈合过程中的作用。
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cust-其他引物
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200ul*10um*2
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实时定量聚合酶链反应（PCR）
将小鼠皮肤组织研磨成粉末，使用Trizol试剂（15596026CN；Thermo Fisher Scientific，美国马萨诸塞州）提取RNA。将RNA反转录获得cDNA。在48孔板中配置实时定量PCR反应体系：1 μL cDNA溶液、0.3 μL 10 μmol/L正反向引物对（S100A9：tnt7547a，BioTNT，中国上海；GAPDH：B662304-0001，Sangon Biotech，中国上海）、5 μL实时荧光定量PCR扩增预混液（A25741；Thermo Fisher Scientific，美国马萨诸塞州），并加入无RNA酶水至终体积10 μL。离心混匀液体后，使用实时定量PCR仪（Applied Biosystems，美国马萨诸塞州）进行反应。计算每个样品的循环阈值（CT值）。
结果：
糖尿病小鼠中 S100A9 和炎症因子的表达情况。(A, B)糖尿病小鼠（DM；n = 8）和非糖尿病小鼠（Ctrl；n = 7）的体重和空腹血糖水平。(C, D)糖尿病小鼠和非糖尿病小鼠的伤口愈合情况。(E)糖尿病小鼠和非糖尿病小鼠伤口皮肤组织中 S100A9 的表达情况。(F)糖尿病小鼠和非糖尿病小鼠伤口皮肤组织中 S100A9 和炎症因子的表达情况。β-actin 作为内参。Ctrl：对照组；DM：糖尿病组；FBG：空腹血糖；IL：白细胞介素；S100A9：S100 钙结合蛋白 A9；TNF-α：肿瘤坏死因子-α。
结论：研究共鉴定出283个糖尿病足溃疡相关的差异表达基因（DEGs）和42个节点基因。在糖尿病患者和非糖尿病患者的皮肤中，有43个基因表达存在差异。通过对这些最为显著的DEGs和节点基因进行比对，锁定了S100A9作为目标基因。研究发现，糖尿病患者的血浆中S100A9水平显著高于非糖尿病患者（178.40 ± 44.65 ng/mL对比40.84 ± 18.86 ng/mL），在慢性溃疡中S100A9水平同样升高，且伤口愈合时间与血浆中S100A9水平呈正相关。此外，炎症细胞因子（肿瘤坏死因子-α、白细胞介素[IL]-1和IL-6）以及相关通路蛋白（磷酯化细胞外信号调节激酶[ERK]、磷酯化p38、磷酯化p65和蛋白激酶B[Akt]）的水平也有所上升。与非糖尿病皮肤相比，慢性糖尿病溃疡的表皮层显著变薄（24.17 ± 25.60 μm对比412.00 ± 181.60 μm）。糖尿病足部的S100A9显著上调，与伤口愈合时间延长相关。S100A9可能通过干扰局部炎症反应和皮肤再上皮化过程，阻碍糖尿病伤口的愈合。