IF 15.8| BioTNT助力生物医疗研究:双层巯基化海藻酸盐/聚乙二醇二丙烯酸酯水凝胶顺序释放小细胞外囊泡以实现无瘢痕伤口愈合
2021年3月,上海交通大学附属第六人民医院骨科、上海先进高分子材料重点实验室、教育部超细材料重点实验室、华东理工大学材料科学与工程学院实验室共同在国际期刊《ACS Nano》上发表的,题为“Sequential Release of Small Extracellular Vesicles from Bilayered Thiolated Alginate/ Polyethylene Glycol Diacrylate Hydrogels for Scarless Wound Healing”的论文。沈一帆、徐关哲、黄焕轩、王凯阳、王辉为第一作者,郎美东、高宏、赵世昌为通讯作者。
研究背景:伤口愈合是一个复杂的生理过程,成人伤口愈合常伴随瘢痕形成,过度的瘢痕会影响组织功能恢复,严重时导致瘢痕疙瘩和增生性瘢痕(HS) ,给患者带来生理和心理上的痛苦。当前治疗瘢痕的主要方法是手术切除,但效果往往不尽人意。因此,迫切需要一种能促进快速伤口愈合且无瘢痕形成的治疗策略。近年来,小细胞外囊泡(sEVs)在组织再生领域受到广泛关注,其可作为生物活性因子载体,参与细胞间通讯,有潜力用于伤口愈合治疗。同时,miR - 29b - 3p 被发现与瘢痕形成相关,可能是抑制 HS 的潜在治疗靶点。此外,海藻酸钠(SA)基水凝胶因良好的生物相容性在组织工程中应用广泛,通过调整其与聚乙二醇二丙烯酸酯(PEG - DA)的比例可实现生物活性因子的时空差异释放123。
主要研究信息:本研究成功设计了基于 SH/PEG - DA 水凝胶序贯释放 sEVs 的无瘢痕伤口愈合敷料及瘢痕病因治疗策略。双层 SA - SH/PEG - DA 水凝胶通过硫醇 - 烯点击化学制备,能实现 sEVs 的序贯释放。在伤口愈合的不同阶段,B - sEVs 和 B - miR - 29b - sEVs 分别从水凝胶的下层和上层释放,发挥促进伤口愈合和抑制 HS 形成的作用。SR - sEVs@BSSPD 的这些生物医学功能构成了一种有效的对症治疗策略,有望改善皮肤再生并抑制 HS 形成。
使用产品:
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CL-mouse-Rnu6B
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120T
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实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)。使用针对微小 RNA-29-3p(
MiR-29-3p)和核仁小 RNA U6B(RNU6B,上海
BioTNT公司,中国)的微小 RNA 特异性实时荧光定量聚合酶链式反应检测试剂盒进行互补脱氧核糖核酸(cDNA)合成和实时荧光定量聚合酶链式反应。将微小 RNA-29-3p 的表达水平以核仁小 RNA U6B 的表达水平作为内参进行标准化。使用 TransScript 一步法 qPCR 第一链 cDNA 合成超混合试剂(购自中国北京的全式金生物技术有限公司)进行 cDNA 合成。采用 TransStart Top Green qPCR 预混液(全式金生物技术有限公司)进行实时荧光定量聚合酶链式反应,并且对结果进行标准化处理。
关于本产品
优势:
1. 应用茎环逆转录引物进行逆转录,可以区分成熟的microRNA和Pre microRNA;
2. 应用BioTNT microRNA qRT-PCR sybgreen Detection Kit,已经优化的适合特异茎环逆转录引物进行CDNA合成的protocol,用于120个microRNA样本的已知第一链CDNA合成;
3. BioTNT 经验证的特异性茎环系统assay 可以提供您最方便的实验方案;采用了120Tests的包装,方便您的实验;
特征:
本方法可以采用经典的trizol法抽提得到的总RNA;
检测的特异性:独特的microRNA茎环逆转录引物的设计技术及其优化的反应体系避免了非特异性扩增、特别是Pre-microRNA的污染;
检测分辨率高:该系统能分辨单碱基差异的microRNA;
一站式解决方案:BioTNT不仅提供检测的试剂盒,还提供经验证的人源、小鼠源、大鼠源的特异性microRNA assay;
检测灵敏度高:可在低至pg级的总RNA中检测到特异表达的microRNA。