产品参数
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极速RNA提取试剂盒(细胞,组织)
Fast total RNA isolation kit
01.产品介绍
本试剂盒采用独特的裂解液,可快速可靠的从细胞、动物组织、植物组织、病毒液样本、抗凝全血、培养细菌中纯化出高纯度的总RNA。该试剂盒是目前国际上操作步骤最少、用时最短的RNA提取试剂盒(最快5分钟)。应用本试剂盒提取的RNA可直接用于反转录、基因克隆、定量检测、文库构建、杂交等多种分子生物学实验。
货号:A2010A110, 50T;
A2010A110S, 10T
产品包装清单
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品名
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(A2010A110,50T)(A2010A110S,10T)
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A2010A110.1
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LB1(裂解液1)
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15mL(3ml)
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A2010A110.2
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BB2(裂解液2)
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40mL(8ml)
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A2010A110.3
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Washing Buffer(洗液)
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55mL(10ml)
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A2010A110.4
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Nuclease Free H2O(无酶水)
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10mL(2ml)
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A2010A110.5
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吸附柱
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50套(10套)
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A2010A110.6
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收集管
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50个(10个)
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A2010A110.m
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说明书
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1份
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02.质量标准及安全说明
质量标准及安全说明
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原料及包装名称
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质量标准
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主要毒性
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LB1
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——
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腐蚀性
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BB2
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——
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腐蚀性
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Washing Buffer
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——
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——
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Nuclease Free H2O
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——
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——
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所有原料及包装检验采用严格的生物试剂质量标准,检测项超40项,保证实验的准确性及可重复性。
03.产品运输和保存条件
【运输】本品常温运输。
【保存】室温避光保存,1年有效。
04.产品使用说明
4.1 样本使用量及RNA产量:
样本类型
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样本量
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RNA产量
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培养细胞
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100-107个
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0.1-30μg
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动物组织
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10-40mg
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5-30μg
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植物组织
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40-100mg
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5-30μg
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病毒液/体液/血清/血浆
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150μL
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0.5-5μg
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培养细菌
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106-109个
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0.5-15μg
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以大肠杆菌为例,109/mL细菌的OD600≈1。
4.2 裂解/上柱(1.5mLEP管中处理)
4.2.1 培养细胞:胰酶消化后,离心收集细胞沉淀,用20-30μL水或PBS重悬细胞沉淀(务必重悬充分)。加入120μL LB1漩涡混匀30s(有未溶解的细胞团块,用枪头吹打,助溶解),加入500μL BB2颠倒混合均匀,倒入吸附柱中。13000rpm离心30s,倒掉废液,进行后续洗涤/洗脱步骤。
4.2.2a 组织样品----采用研钵进行研磨:用液氮研磨粉碎组织样本,将研磨粉碎的样品加入到200μL LB1中,漩涡混合均匀1min(有块状组织未溶解的,要使用枪头吹打,助消化),加入500μL BB2上下颠倒混合均匀,13000rpm离心15s。
将上清倒入吸附柱中(动作轻柔,勿将未消化的组织块倒入吸附柱),13000rpm离心30s,倒掉废液,进行后续洗涤/洗脱步骤。
4.2.2b 组织样品----采用钢珠进行研磨:将组织样品加入到300μL LB1中(1.5mL EP管),并加入几粒钢珠,置于组织研磨仪中,研磨1-2min。向研磨后的匀浆液中加入750μL BB2,漩涡混匀5s,13000rpm离心1min。用1mL吸头吸取750μL上清液到吸附柱中。13000rpm离心30s,倒掉废液,进行后续洗涤/洗脱步骤。
注意:植物组织的匀浆效果通常较动物组织差一些,所以一般推荐采用液氮条件下研钵来研磨。在采用钢珠研磨的条件下务必将组织研磨粉碎,否则会导致产率降低。
4.2.3 病毒液/体液/血清/血浆:吸取150μL病毒液/体液样品到加入到120μL LB1中,漩涡混合均匀30s。直接加入500μL BB2中,漩涡混合均匀15s。倒入吸附柱中,13000rpm离心30s,倒掉废液,进行后续洗涤/洗脱步骤。
4.2.4 培养细菌:收集菌体后,用20-30μL水重悬菌体(务必重悬充分),加入120μL LB1漩涡混匀30s,加入500μL BB2上下颠倒混合均匀,倒入吸附柱中。13000rpm离心30s,倒掉废液,进行后续洗涤/洗脱步骤。
4.3 洗涤和洗脱
向吸附柱中加入500μL Washing Buffer,13000rpm离心15s。重复此步骤一次。将吸附柱重新放回离心机,13000rpm离心1min,将残留的乙醇彻底甩干。将吸附柱芯放入到2mL Nuclease Free收集管中,向吸附柱芯中加入20-50μL Nuclease Free H2O,室温放置1min,13000rpm离心1min,洗脱液即为提取的RNA,冷冻保存。
05/注意事项
5.1 本产品仅供研究用,请勿用于人体及动物的治疗、临床诊断或作为食品、化妆品、家庭用品的添加剂等用途。
5.2 LB1和BB2均具有腐蚀性,注意防护。
产品可以登陆冠泰生物商城订购:请扫描以下图标。
产品由上海冠泰生物科技有限公司提供。